انتقال پروتئین به سلول گیاهی(دارای دیواره سلولی) توسط الکتروپوراسیون
مهندسی ژنتیک یک ابزار مولکولی قدرتمند است که به طور گسترده در زمینه های بسیاری از علوم زیستی استفاده شده است. یکی از محبوب‌ترین ابزارهای مهندسی ژنوم Cre recombinase است که نوترکیبی بین دو توالی DNA مورد توافق خود به نام loxP را کاتالیز می‌کند. سیستم Cre/loxP به عنوان یک پلت فرم همه کاره برای حذف ژن خاص نسل/سلول، حذف نشانگرهای قابل انتخاب و بازآرایی کروموزومی عمل کرده است و به طور گسترده در ارگانیسم های مختلف استفاده شده است. اگرچه سیستم Cre/loxP در سلول‌های گیاهی نیز استفاده شده است، اما کاربرد آن در مقایسه با سلول‌های حیوانی محدود بوده است. دیواره سلول گیاهی یکی از موانع اصلی تحویل مواد زیستی به سلول های گیاهی است.
مهندسی ژنوم سلول‌های گیاهی کشت‌شده به دلیل دشواری انتقال بیومواد در سراسر دیواره سلولی محدود است، که سلول‌های گیاهی را در برابر استرس مکانیکی و ورود مواد برون‌زا محافظت می‌کند. بنابراین، انتقال بیومواد به سلول های گیاهی به طور گسترده ای دشوارتر از تحویل به سلول های مشتق شده از موجودات دیگر در نظر گرفته شده است.
یکی از راه‌های رفع این محدودیت استفاده از پروتوپلاست‌هایی است که دیواره‌های سلولی آن‌ها توسط سلولاز و/یا پکتیناز حذف می‌شوند. چندین مطالعه نشان داده اند که مواد زیستی برون زا مانند DNA، RNA و پروتئین را می توان با موفقیت به پروتوپلاست های تولید شده از موجودات گیاهی مختلف مانند تنباکو، آرابیدوپسیس، و برنج انتقال داد. با این حال، نشان داده شده است که بازسازی گیاهان از پروتوپلاست ها در بسیاری از گونه های گیاهی به دلیل حساسیت به تنش‌های بیوشیمیایی یا مکانیکی غیرممکن یا ناکارآمد است.
انتقال پروتئین به سلول گیاهی دارای دیواره
بنابراین Yuichi Furuhata و همکارانش در مقاله A method using electroporation for the protein delivery of Cre recombinase into cultured Arabidopsis cells with an intact cell wall Yuichi Furuh روشی برای تحویل موثر پروتئین ها به سلول های گیاهی با دیواره سلولی سالم ایجاد کردند و پروتئین Cre را به سادگی و به طور موثر به سلول های Arabidopsis thaliana (با بازدهی تا 83 درصد)، حتی در حضور دیواره سلولی، با غوطه ور کردن سلول های Arabidopsis thaliana در یک بافر بهینه و انجام الکتروپوریشن انتقال دادند.
شرکت پارس تراوا اولین و تنها تولید کننده دستگاه الکتروپوراسیون در ایران بوده است برای ثبت سفارش دستگاه الکتروپوراسیون یا کووت الکتروپوریشن 2 و 4 میلی‌متری با شماره ۰۹۰۲۴۰۵۱۸۶۲ تماس بگیرید.
